研究 | 基于P-gp为靶点的循环microRNAs作为难治性癫痫外周血生物标志物的评价

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目前临床上缺乏诊断难治性癫痫的可靠生物标志物，尤其是可以在外周血检测的生化指标。既往研究表明以P-gp为代表的多药耐药转运体的表达增高是导致癫痫耐药的重要原因之一。但是P-gp在脑内主要表达在血脑屏障上，活体上无法直接检测。因此，寻求可以在外周血测定的且靶向调控P-gp的内源性分子将有助于解决这一难题。既往研究表明miRNAs作为一类广泛存在于哺乳动物中的内源性小分子RNA，可以通过调控P-gp的表达参与癫痫耐药。在体内，miRNAs可以在外周血中稳定表达，并且具有组织特异性，其表达丰度与疾病的病理状态密切相关。此外，外周血miRNAs的检测快速方便，无创而且经济，具备了临床生物标志物的要求。因此，我们的研究旨在探索外周血中基于P-gp为靶点的miRNAs作为诊断难治性癫痫外周血生物标志物的临床价值。

初步筛选发现，血浆芯片检测提示在药物敏感性癫痫和难治性癫痫患者血浆中存在8条明显差异表达的miRNAs，生物信息学分析提示这些差异表达的miRNAs广泛参与神经系统的多种生理和病理过程，如神经元的分化、突触的修饰、递质的囊泡运输等。在体外耐药的微血管内皮细胞中筛选发现miR-146a-5p和miR-138-5p可以调控P-gp的表达。在此基础上的验证分析实验发现，与血浆芯片筛选的差异miRNAs相比，靶向调控P-gp的miR-146a-5p和miR-138-5p具有更高的诊断价值，敏感性和特异性达85%以上，且两者联合作为诊断指标预测难治性癫痫具有较高的价值，其ROC分析曲线下面积达到90%以上。

图1　目标miRNAs的ROC曲线分析

进一步研究发现miR-146a-5p和miR-138-5p可能通过间接调控NF-κB信号通路参与调控P-gp的表达。NF-κB是调控P-gp的重要因子，ABCB1的启动子区存在NF-κB p65的结合位点。NF-κB信号通路是调控多种生理病理过程的中心环节，其可以接受脑内多种刺激诱导P-gp的表达。于是通过进一步研究发现miR-146a-5p和miR-138-5p可以通过抑制NF-κB信号通路调控难治性癫痫大鼠脑内P-gp的表达，提高大鼠脑内ASMs的浓度。

图2　miRNAs通过调控P-gp表达参与调控癫痫耐药机制图

研究结果提示miR-146a-5p和miR-138-5p作为辅助诊断难治性癫痫的外周血的生物标志物具有一定的临床价值，为难治性癫痫的早期诊断提供潜在的外周血指标。但是该实验中纳入的难治性癫痫患者的样本量还较小，需要进一步提高样本数量，以验证这一结论。

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原文网址：

https://aepi.biomedcentral.com/articles/10.1186/s42494-022-00116-x

Cite this article

Xie, Y., Shao, Y., Gong, X. et al. Evaluation of P-glycoprotein-targeting circulating microRNAs as peripheral biomarkers for medically intractable epilepsy. Acta Epileptologica 5, 5 (2023). https://doi.org/10.1186/s42494-022-00116-x

作者简介

通信作者：陈英辉　教授

复旦大学附属华山医院神经内科主任医师、教授，中国卒中学会移动医疗分会委员、上海医师协会神经内科分会委员。主要的研究方向为癫痫发病及耐药机制。

第一作者：谢阳梅　博士

复旦大学上海医学院神经病学专业科研型博士、复旦大学附属华山医院神经内科住院医师（规培），熟练掌握神经内科常见疾病的诊疗常规，掌握长程脑电图检查操作和判读。主要的研究方向为癫痫耐药的分子机制，目前已发表科研论文9篇，其中SCI收入7篇，国家发明专利2项。

# Acta Epileptologica 简介 #

主编：中国抗癫痫协会创会会长李世绰研究员

副主编：复旦大学华山医院洪震教授，德国Erlangen-Nürnberg大学Hermann Stefan教授，四川大学华西医院周东教授

Acta Epileptologica（简称AE）是中国抗癫痫协会官方英文期刊，国内唯一获得CN号（CN51-1776/R）的癫痫专业领域英文学术期刊；与英国Springer Nature公司旗下BioMed Central （BMC）出版集团合作出版；免出版费的开放获取（OA）模式；新投稿常规反馈时间3天，绿色通道最快接收时间10天；文章发表后进行国内国外全面推广。欢迎投稿！

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