【动植物检疫】海关技术规范解读 | 车前草花叶病毒检疫鉴定方法（SN/T 5457-2022）

2022年7月7日，中华人民共和国海关总署发布了2022年第57号公告（关于发布《进境种用雏禽指定隔离检疫场建设规范》等90项行业标准的公告），其中《车前草花叶病毒检疫鉴定方法》SN/T 5457-2022自2023年2月1日起实施，本文对该行业标准进行解读。

一、该标准研制的背景与意义

百合是世界上集观赏、食用为一体的重要园艺作物。为满足我国对百合的巨大需求，目前每年均需从荷兰引进大量的百合鳞球茎类繁殖材料，因此带毒鳞球茎随贸易进入我国进行传播和蔓延的风险也越来越高。据报道，目前侵染百合的病毒多达二十余种，包括黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus，CMV）、百合无症病毒（Lily symptomless virus，LSV）、百合斑驳病毒（Lily mottle virus，LMoV）、李属坏死环斑病毒（Prunus necrotic ring spot virus，PNRSV）等。但由于各地栽培品种来源不同，且缺乏严格的病毒防控措施，百合出现病毒侵染的现象也越来越严重。

车前草花叶病毒（Plantagoasiatica mosaic virus，PlAMV）为Potexvirus属成员。该病毒于1976年在前苏联车前草中首次报道，2003年由日本学者证实可侵染百合，在2010年才由荷兰植物保护署首次报道在荷兰百合上发现，当年其在温室中引发的损失率高达80%，且据荷兰官方报道，在2010、2011、2012连续三年生长季进行检测中发现，病毒感染率呈逐年上升的趋势。

在我国尚未有发生该病毒的报道。此病毒虽不是检疫性有害生物，但可引发受感染植株的系统性坏死症状，使其丧失使用价值，对鲜切花生产影响较大。

健康百合植株及实验室血清学检测

二、该标准的适用范围

本标准适用于所有进境百合属（Lilium spp.）、车前草（Plantago asiatica）等寄主植物中车前草花叶病毒的检疫鉴定。

三、该标准的技术原理

本标准针对进境百合种球等寄主植物产品，主要依据车前草花叶病毒的血清学、分子生物学特性进行判断。

若在田间，可根据寄主植株典型症状进行比较观察。

车前草花叶病毒在百合植株上的症状

车前草花叶病毒在百合植株上的症状

四、该标准的特点

1. 建立了特异性良好的车前草花叶病毒实时荧光PCR检测方法

通过车前草花叶病毒外壳蛋白基因（CP基因）序列比对，自主设计出特异性引物和探针组合2组，通过采用多个百合常见病毒病进行验证和不同实验室的协同比对，表明本标准研发的两组引物、探针特异性良好。

2. 检测速度快，缩短了通关流程时间

进口百合种球为低温海运入境，口岸查验时需开箱取样，开箱后的百合种球若长时间停留在口岸，将严重破坏其品质。因此，本标准开发的检测方法，使车前草花叶病毒检测时间最短缩至2~3h，大大提高了通关效率。

3. 广泛适用性

该方法所涉及的检测设备均为口岸实验室常规设备，操作简便、快捷，技术难度不高，且可同批次处理大量样品。为口岸实验室在种球产品中的检测工作提供了便捷。

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供稿单位：综合业务司、大连海关